@MASTERSTHESIS{ 2017:1126055216, title = {BIOPROSPECÇÃO DE FUNGOS FILAMENTOSOS ISOLADOS DE REMANESCENTES DE FLORESTA OMBRÓFILA MISTA PRODUTORES DE POLIGALACTURONASES: POTENCIAL PECTINOLÍTICO DE Penicillium sp.}, year = {2017}, url = "http://tede.unicentro.br:8080/jspui/handle/jspui/732", abstract = "As pectinases têm sido alvo de muitos estudos devido a sua ampla variedade de aplicações nos mais diversos setores industriais. Dentre essas enzimas encontram-se as poligalacturonases, as quais são empregadas principalmente no processo na clarificação de sucos de frutas. A seleção de microrganismos produtores destas enzimas torna-se uma etapa importante em processos biotecnológicos. Deste modo, o objetivo desse estudo foi isolar diversas linhagens fúngicas e avaliar o seu potencial de produção de poligalacturonases, utilizando a casca de abacaxi e casca de maracujá como substrato. A partir da seleção da melhor linhagem produtora, o delineamento Plackett-Burmann foi empregado, a fim de selecionar as variáveis que mais influenciam a produção dessas enzimas. Posteriormente, os parâmetros ótimos para a produção de poligalacturonases foram verificados, empregando-se o Delineamento Central Composto Rotacional e a Metodologia de Superfície de Resposta. Por fim, as poligalacturonases produzidas foram caracterizadas bioquimicamente. Como resultado, 46 linhagens foram isoladas, evidenciando-se, por meio do teste semi-quantitativo, a capacidade de produção de poligalacturonases por todas as linhagens avaliadas. Já no teste quantitativo, verificou-se que o fungo FX32 foi o melhor produtor dessas enzimas utilizando casca de abacaxi como substrato, correspondendo a 6,12 U mL-1. A partir do delineamento Plackett-Burmann, constatou-se que a concentração do substrato, o pH e o tempo de cultivo foram os parâmetros que exerceram influência significativa sobre a produção de poligalacturonases. Por esta razão, esses fatores foram considerados como as variáveis independentes no Delineamento Central Composto Rotacional. Por meio de sua realização, estabeleceu-se as melhores condições para a produção de poligalacturonase por Penicillium sp. sendo elas 2,9% de casca de abacaxi como substrato, pH de cultivo de 7,8 e tempo de cultivo de 8,6 dias, correspondendo a uma produção de 106,20 U mL-1. Em relação as suas características bioquímicas, constatou-se que as enzimas produzidas por essa linhagem fúngica foram mais ativas a 50 °C e em pH 5,5. As poligalacturonases também foram muito estáveis em pH 5,0 e 5,5, onde mais de 80% de sua atividade inicial foi verificada. Em relação a estabilidade térmica, observou-se que essas enzimas foram mais estáveis a 45 ºC. O efeito de diversos íons e substâncias sobre a atividade poligalacturonásica também foi avaliado, evidenciando-se uma ativação enzimática na presença de íons Mn+2, Ca+2 e mercaptoetanol e uma forte inibição por Hg+. Por fim, a da hidrólise da casca de abacaxi foi realizada, utilizando-se os extratos brutos de Penicillium sp. e Aspergillus flavus. Uma liberação de glicose equivalente a 67,42 mg g-1 de substrato foi alcançada, após o estabelecimento das condições ótimas de hidrólise, correspondentes a 15 horas de reação, pH 5,0 e temperatura de 50 °C. A casca de abacaxi mostrou-se uma boa fonte indutora da produção de poligalacturonases por Penicillium sp., como também um substrato promissor para a obtenção de monômeros de glicose por meio de sua hidrólise enzimática. Os resultados obtidos nesse estudo fornecem informações importantes, a fim de inferir possíveis aplicações industriais para as enzimas em estudo.", publisher = {Universidade Estadual do Centro-Oeste}, scholl = {Programa de Pós-Graduação em Biologia Evolutiva (Mestrado)}, note = {Unicentro::Departamento de Biologia} }