@MASTERSTHESIS{ 2016:313720044, title = {BIOPROSPECÇÃO DE FUNGOS ISOLADOS DE REMANESCENTES DE FLORESTA OMBRÓFILA MISTA PRODUTORES DE LIPASES: POTENCIAL LIPOLÍTICO DE Trichoderma sp.}, year = {2016}, url = "http://tede.unicentro.br:8080/jspui/handle/jspui/728", abstract = "O solo da Floresta Ombrófila Mista tem sido o foco de poucos estudos sobre sua diversidade microbiana. O solo é um habitat que apresenta uma ampla diversidade microbiana. Desta forma, pode ser explorado como uma fonte de microrganismos produtores de enzimas de interesse industrial. Dentre as diversas enzimas existentes, as lipases (triacilglicerol-acil-hidrolases E.C.3.1.1.3) são muito utilizadas, em virtude da grande gama de reações que podem catalisar, como a hidrólise total ou parcial de triacilgliceróis (TAG), além de reações de esterificação, transesterificação e interesterificação de lipídios. Diante disto, o presente estudo objetivou isolar diferentes linhagens fúngicas a partir de solo de remanescentes de Floresta Ombrófila Mista e avaliar o potencial de produção de lipases pelos fungos isolados. A partir da seleção da melhor linhagem produtora, o delineamento Plackett-Burman foi empregado, a fim de selecionar as variáveis que mais afetam este processo. Posteriormente, o Delineamento Central Composto Rotacional (DCCR) aplicável à Metodologia de Superfície de Resposta (RSM) foi empregado, no intuito de se estabelecer as condições ótimas para a produção dessas enzimas, utilizando a torta de mamona como substrato. Por fim, as lipases produzidas sob condições otimizadas foram bioquimicamente caracterizadas. O isolamento dos fungos foi realizado empregando-se a técnica de diluição sucessiva, permitindo a obtenção de 65 linhagens fúngicas. A capacidade de produção de lipases foi evidenciada em 17 das linhagens avaliadas, destacando-se como melhor produtor uma linhagem de Trichoderma sp. As variáveis concentração de Tween 80, CaCl2, NH4Cl e extrato de levedura foram selecionadas como as que mais afetam o processo de produção de lipases por Trichoderma sp. Por esta razão, estas mesmas variáveis foram consideradas no DCCR. Após a otimização, os níveis de produção atingidos corresponderam a 60,70 U/mL. Por meio da caracterização bioquímica realizada, constatou-se que as lipases de Trichoderma sp. apresentam atividade ótima em pH neutro e a 30 °C. Em relação ao efeito de diversos íons e substâncias sobre a atividade lipásica, verificou-se que o Na+2 na concentração de 0,2 mM promoveu a ativação destas enzimas. Ainda, um efeito ativador foi observado em presença do surfactante Triton X-100. Dentre os distintos solventes orgânicos avaliados apenas o tolueno a 1% ativou as enzimas produzidas. Os resultados obtidos neste trabalho revelam o potencial de utilização da torta de mamona como substrato para a produção de lipases. O emprego deste resíduo para a produção de enzimas microbianas se mostra bastante interessante, visto que tantos benefícios econômicos quanto ambientais poderão ser obtidos a partir de sua utilização. Em adição, os estudos de bioprospecção aqui apresentados oferecem novas perspectivas, a fim de promover a valorização bem como a exploração racional dos remanescentes de Floresta Ombrófila Mista, áreas prioritárias para a conservação da biodiversidade brasileira.", publisher = {Universidade Estadual do Centro-Oeste}, scholl = {Programa de Pós-Graduação em Biologia Evolutiva (Mestrado)}, note = {Unicentro::Departamento de Biologia} }