@MASTERSTHESIS{ 2015:130562812, title = {Isolamento e seleção de fungos produtores de lipases: potencial lipolítico de Fusarium oxysporum e da levedura L1}, year = {2015}, url = "http://localhost:8080/tede/handle/tede/394", abstract = "Devido a sua importância biotecnológica, um grande número de estudos envolvendo a produção de lipases por fungos tem sido desenvolvido nos últimos anos. O presente trabalho objetivou avaliar a produção de lipases por fungos isolados a partir de diferentes ambientes. O isolamento dos fungos foi realizado empregando-se a técnica de diluição sucessiva, permitindo a obtenção de 54 linhagens fúngicas. Destas, 56,37% corresponderam a linhagens leveduriformes, enquanto que 43,63% corresponderam a fungos filamentosos. A capacidade de produção de lipases foi evidenciada em todas as linhagens isoladas. No entanto, em presença de azeite de oliva, destacam-se os níveis de produção apresentados pelo isolado leveduriforme L1 (45,92 U/mL) e pelo fungo filamentoso Fusarium oxysporum (12,16 U/mL), ambos isolados a partir de óleo contaminado. Nos estudos envolvendo a produção de lipases pela levedura L1, maiores níveis de lipases foram obtidos ao se empregar o do soro de queijo como substrato, correspondendo a uma produção de 26,70 U/mL. Após a otimização empregando-se o Delineamento Central Composto Rotacional (DCCR) aplicável à Metodologia de Superfície de Resposta (MSR), os níveis de produção atingidos corresponderam a 267,07 U/mL. As melhores condições estabelecidas para a produção de lipases pela levedura L1 foram concentração do soro de queijo 1,1%, pH de cultivo 4,4 e tempo de cultivo de 24 horas. Adicionalmente, a linhagem de F.oxysporum foi selecionada para ser empregada nos estudos de otimização de lipases, empregando-se o DCCR e a MSR, em presença da casca de butiá. Os melhores níveis de produção foram obtidos quando a concentração da casca de butiá utilizada foi 2,9%, o pH do meio de cultivo ajustado para 4,2 e tempo de cultivo de 4,4 dias, correspondendo a 35,82 U/mL. A caracterização bioquímica das enzimas produzidas sob condições ótimas tambem foi conduzida, revelando que as lipases apresentam atividade ótima em pH neutro e a 45-50ºC, sendo altamente estáveis em pH neutro/alcalinos, bem como a 45°C. Em relação ao efeito de diversas substâncias sobre a atividade lipásica, verificou-se que tanto o ?-mercaptoetanol na concentração de 10mM, quanto os íons Ca+2 a 2mM foram capazes de ativar estas enzimas. Ainda, um efeito ativador foi observado em presença dos surfactantes CTBA e SDS, revelando o potencial de aplicação dessas enzimas na indústria de detergentes. Contrariamente, as lipases foram inibidas por citrato de sódio, Mg+2, Pb+3 e EDTA. Ao avaliar o efeito de diferentes solventes orgânicos sobre a atividade lipásica, observa-se que apenas o hexano a 20% apresentou um efeito ativador. Por fim, a atividade de esterificação das lipases de F. oxysporum sobre diferentes óleos vegetais foi avaliada. Maiores níveis de atividade foram observados quando o óleo de andiroba foi empregado, revelando o potencial de aplicação destas enzimas para a produção de biodiesel, a partir deste substrato. O emprego do soro de queijo e da casca de butiá como substratos para a produção de lipases se mostra bastante promissor, visto que tantos benefícios econômicos quanto ambientais poderão ser obtidos, a partir de sua utilização.", publisher = {UNICENTRO - Universidade Estadual do Centro Oeste}, scholl = {Programa de Pós-Graduação em Biologia Evolutiva (Mestrado)}, note = {Unicentro::Departamento de Biologia} }