@MASTERSTHESIS{ 2017:2072445087, title = {AVALIAÇÃO DE MECANISMOS OXIDATIVOS ENVOLVIDOS NAS ALTERAÇÕES DA FUNÇÃO ESPERMÁTICA DE RATOS WISTAR APÓS EXPOSIÇÃO À NANOPARTÍCULAS DE PRATA}, year = {2017}, url = "http://tede.unicentro.br:8080/jspui/handle/jspui/1742", abstract = "As nanopartículas de prata (AgNPs) são comumente utilizadas por suas propriedades antibacterianas, antifúngicas e antivirais, porém, apesar do crescente interesse pelo seu mecanismo de ação, benefícios e possível toxicidade, devido a ampla exposição e variação no tamanho das nanopartículas (NPs), sua caracterização toxicológica ainda não está bem definida. Previamente, observamos alterações na integridade espermática, com comprometimento da membrana plasmática e acrossomal e redução da atividade mitocondrial em ratos expostos durante a pré-puberdade a baixas doses. O equilíbrio entre a atividade pró-oxidante e a proteção antioxidante é essencial para a maturação, armazenamento e viabilidade dos espermatozóides. Assim, nosso objetivo foi avaliar se a atividade enzimática da catalase (CAT), superóxido dismutase (SOD), glutationa peroxidase (GPX) e glutationa redutase (GSR), e se a expressão dos transcritos dos genes envolvidos nesses mecanismos (Cat, Sod1, Gpx4 var1, Gpx4 var2 e Gsr) foi alterada. Ratos Wistar pré-púberes foram tratados com 15; 7,5; 3,75 ou 1,875 μg de AgNP/Kg, e um grupo controle recebeu apenas o diluente. A administração das doses foi por gavagem, em dias alternados, do 23º ao 60º dia de idade, onde os animais foram eutanasiados por sobrecarga anestésica e os testículos foram excisados, congelados em nitrogênio líquido e mantidos a -80 °C. Após extração do mRNA foi realizada a identificação de alterações de expressão dos transcritos para os genes da Cat, Sod1, Gpx4 var1,Gpx4 var2 e Gsr por transcrição reversa seguida por PCR em tempo real; foi realizada quantificação proteica pelo método de Bradford e, para mensuração das atividades enzimáticas foram realizados o método descrito por Aebi para a CAT e kits comerciais para a SOD, GPX e GSR, seguindo as instruções do fabricante. Foram consideradas diferenças estatísticas quando p<0,05. Quanto aos efeitos da exposição pré-pubere às AgNPs sobre a expressão gênica testicular, a expressão de Cat foi aumentada apenas no grupo tratado com a menor dose, 1,875 μg/Kg (p < 0,01). A expressão de Sod1 diminuiu no grupo tratado com a dose de 3,75 μg/Kg de AgNPs (p < 0,05). A expressão dos níveis de mRNA de Gpx4 var1 aumentou em todos os grupos tratados (p < 0,001 para o grupo tratado com 3,75 μg/Kg, e p < 0,0001 para os grupos tratados com 1,875 μg/Kg, 7,5μg/Kg e 15 μg/Kg); por outro lado, a exposição pré-pubere às AgNPs diminuiu os níveis de expressão do transcrito de Gpx4 var2 somente no grupo exposto à dose de 3,75 μg/Kg de AgNPs (p < 0,001). A exposição pré-pubere à dose de 3,75 μg/Kg de AgNPs diminuiu os níveis de mRNA de Gsr (p < 0,001). Os ensaios de atividade enzimática mostraram que a exposição pré-pubere às AgNPs causou um aumento na atividade enzimática da CAT no grupo exposto a dose de 15 μg/Kg de (p < 0,05). A atividade enzimática da SOD não sofreu alterações significativas. A atividade enzimática da GPX e da GSR também foi aumentada no grupo exposto à maior dose, 15 μg/Kg de AgNPs (p < 0,001 e p < 0,01, respectivamente). Todos os transcritos apresentaram alguma alteração na sua expressão. Os resultados sugerem que as AgNPs podem agir como desreguladores químicos e interferir nos genes ligados ao equilíbrio oxidativo bem como na atividade enzimática das enzimas envolvidas neste processo, entretanto, mais avaliações são necessárias para se explicar os mecanismos envolvidos em tais alterações.", publisher = {Universidade Estadual do Centro-Oeste}, scholl = {Programa de Pós-Graduação em Ciências Farmacêuticas (Mestrado / Associação Ampla com UEPG)}, note = {Unicentro::Departamento de Farmácia} }