@MASTERSTHESIS{ 2019:714338498, title = {DESENVOLVIMENTO DE IMUNOSSENSOR ELETROQUÍMICO PARA O MONITORAMENTO DE CÉLULAS CANCEROSAS}, year = {2019}, url = "http://tede.unicentro.br:8080/jspui/handle/jspui/1582", abstract = "Câncer é a segunda causa de morte no mundo, e foi responsável por cerca de 10 milhões de mortes em 2018, de acordo com a Organização Mundial de Saúde. Diversos estudos apontam que a transferrina é um biomarcador canceroso em potencial, uma vez que células cancerosas expressam níveis de transferrina maiores que células saudáveis. Neste contexto, este trabalho descreve o desenvolvimento de um imunossensor eletroquímico para a detecção de transferrina (Tf), nas formas apo-Tf (não ligada à ferro) e holo-Tf (ligada à ferro). O imunossensor foi baseado na imobilização do anticorpo policlonal anti-transferrina (anti-Tf) pelo método de ligação covalente cruzada, empregando os agentes de comprimento zero 1-etil-3-(3-dimetilaminopropil) carbodiimida (EDC) e n-hidroxisuccinimida (NHS). Como superfície transdutora, placas de ITO (óxido de índio dopado com estanho) foram utilizadas e os resultados foram obtidos pela adequação dos dados experimentais ao circuito equivalente de Randles. Todas as medidas foram realizadas pela técnica de espectroscopia de impedância eletroquímica (EIE), em meio de hexacianoferrato de potássio (II) 4 mmol L-1 preparado em tampão fosfato pH 7,4. A caracterização dos imunossensores foi realizada utilizando a técnica de EIE e voltametria cíclica (VC), avaliando assim a resposta eletroquímica de apo-Tf e holo-Tf. Observou-se que os dispositivos desenvolvidos foram capazes de detectar ambas as formas de Tf, em termos de resistência de transferência de carga (Rct). As melhores condições experimentais foram avaliadas para o desenvolvimento dos imunossensores, realizando estudos acerca da aferição da área geométrica do ITO, da ativação da superfície eletródica, do meio de imobilização ao anticorpo, do tempo de incubação e concentração de anti-Tf e do tempo de incubação de cada antígeno. Curvas analíticas foram construídas para cada antígeno, utilizando cinco níveis de concentração em duplicata. Realizou-se um estudo inicial para a validação completa dos dispositivos as figuras de mérito de limites de detecção (LD) e de quantificação (LQ), precisão e linearidade, esta última avaliada estatisticamente por meio de regressão linear e teste de falta de ajuste no nível de 95% de confiança. Ademais, os imunossensores desenvolvidos foram aplicados na detecção de células cancerosas A549 (câncer de pulmão) e MCF-7 (câncer de mama), comparando-as com a linhagem celular saudável dos rins BHK. Visando avaliar se as respostas obtidas diferem estatisticamente das células de controle (BHK) foi realizada uma análise de variância (ANOVA) de um fator e um teste de Dunnett a um nível de 95% de confiança. Assim, foi observado que a resposta impedimétrica das células saudáveis difere significativamente da resposta das células cancerosas, indicando a potencialidade dos imunossensores para o diagnóstico de câncer. Deste modo, o dispositivo construído pode ser considerado como um avanço na detecção de apo-Tf e holo-Tf, bem como em diagnósticos clínicos rápidos e de baixo custo.", publisher = {Universidade Estadual do Centro-Oeste}, scholl = {Programa de Pós-Graduação em Química (Mestrado)}, note = {Unicentro::Departamento de Ciências Exatas e de Tecnologia} }