@MASTERSTHESIS{ 2017:103072560, title = {BIOPROSPECÇÃO DE FUNGOS ISOLADOS DE REMANESCENTES DE FLORESTA OMBRÓFILA MISTA PRODUTORES DE -GLICOSIDASES: POTENCIAL CELULOLÍTICO DE Aspergillus flavus}, year = {2017}, url = "http://tede.unicentro.br:8080/jspui/handle/jspui/1257", abstract = "Nos últimos anos, existe um crescente interesse na obtenção de enzimas fúngicas para utilização em processos industriais. Desta forma, a bioprospecção de micro-organismos com potencial enzimático tem sido alvo de diversos estudos. Dentre as enzimas de interesse biotecnológico, as β-glicosidases são amplamente estudadas devido a suas inúmeras aplicações econômicas, como nas indústrias de papel e celulose, de ração animal, de alimentos, têxtil, entre outras. Esse trabalho teve como objetivo isolar diversas linhagens fúngicas provenientes de solo de remanescentes de Floresta Ombrófila Mista (FOM), bem como avaliar seu potencial de produção de -glicosidases. Adicionalmente, objetivou-se investigar os efeitos de diversos parâmetros físico-químicos sobre a produção de glicosidases pela linhagem melhor produtora, empregando-se a casca de eucalipto como substrato alternativo. Ainda, as enzimas produzidas foram caracterizadas bioquimicamente. Inicialmente, dois remanescentes representativos de FOM na região Centro-Sul do estado do Paraná foram selecionados: o Jardim Botânico de Faxinal do Céu e o Parque Salto São Francisco. A fim de elevar os níveis de-glicosidases produzidos pela linhagem selecionada previamente como melhor produtora, o Delineamento Plackett-Burman, bem como o Delineamento Central Composto Rotacional (DCCR) aplicável à Metodologia de Superfície de Resposta (MRS) foram empregados como ferramentas estatísticas. Dentre as 67 linhagens isoladas a partir dos dois fragmentos de FOM, uma linhagem de Aspergillus flavus foi a que apresentou os melhores níveis de produção de -glicosidases, quando cultivada em presença de casca de eucalipto. Níveis máximos de produção foram atingidos quando a concentração do substrato correspondeu a 2,0%, o pH de cultivo foi ajustado para 5,5, o tempo de cultivo foi de 10 dias e a velocidade de agitação utilizada de 100 rpm, correspondendo a uma produção de 4,16 U mL-1. As -glicosidases produzidas foram mais ativas a 5,5 °C, em pH 4,5, mostrando-se bastante estáveis a 50 °C e em pH 6,0. Ao avaliar o efeito de diversas substâncias sobre a atividade das -glicosidases produzidas, as enzimas foram pronunciadamente ativadas pelo β-mercaptoetanol e NH4+, na concentração de 10 mM, bem como pelo íon Ca+2, a 2 mM. Entretanto, estas enzimas foram fortemente inibidas pelo detergente SDS, EDTA e pelos íons Na+, Mn+2 e Hg+. A casca de eucalipto mostrou-se um substrato promissor para produção de -glicosidases, por ser um resíduo de baixo custo, produzido em grandes quantidades. O presente estudo fornece importantes subsídios, capazes de estimular a conservação, bem como a exploração racional da FOM, uma importante fonte de recursos genéticos e bioquímicos até então pouco explorada.", publisher = {Universidade Estadual do Centro-Oeste}, scholl = {Programa de Pós-Graduação em Biologia Evolutiva (Mestrado)}, note = {Unicentro::Departamento de Ciências Agrárias e Ambientais} }